研究背景

氨基甲酸乙酯( ethyl carbamate,EC)是發(fā)酵食品（如黃酒、醬油）和酒精飲料中的天然副產物，被國際癌癥研究機構（IARC）列為2A類致癌物。其致癌性源于代謝產物（如乙酰基氨基甲酸乙酯環(huán)氧化物）對DNA的損傷作用。隨著酒精飲料消費量上升，EC暴露風險增加。針對食品中氨基甲酸乙酯的檢測，國標GB 5009.223-2014《食品安全國家標準食品中氨基甲酸乙酯的測定》及進出口商品檢驗行業(yè)標準SN/T 0285-2012《出口酒中氨基甲酸乙酯殘留量檢測方法氣相色譜-質譜法》中，均以氣相色譜-質譜法（GC-MS）作為標準檢測方法。氣相色譜-質譜法雖然定性、定量準確，但是涉及到萃取、洗脫、濃縮等極為復雜的前處理過程，操作復雜，耗時長，難以作為快檢技術指導生產。液相色譜-三重四極桿質譜法（LC-MS/MS）因其高靈敏度、優(yōu)異的抗干擾能力，以及高效率，成為EC檢測的新興技術，尤其適用于復雜基質和痕量分析，為食品安全監(jiān)管、工藝優(yōu)化及健康風險評估提供了可靠工具。本方法在文獻基礎上^[1][2][3]（后附），開發(fā)建立了方便、快捷的LC-MS/MS聯(lián)用的痕量氨基甲酸乙酯分析檢測方法。

實驗部分

儀器、試劑與材料

·Thermo Scientific? Vanquish?超高效液相色譜

·Thermo Scientific? TSQ Altis?三重四極桿質譜，配ESI源

·Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18, 3.0 x 150 mm, 2.7 μm

·蒸餾水（屈臣氏）、甲醇、甲酸（色譜純）

實驗方法

色譜條件

色譜柱：Poroshell 120 EC-C18（3.0 x 150 mm, 2.7 μm）

流速：0.35mL/min

柱溫：40℃

進樣量10μL

質譜條件：

離子源參數(shù)

SRM掃描模式

結果與討論

儀器靈敏度、線性范圍和精密度

將高濃度標準品逐級稀釋，配制成系列標準曲線(0.5、2、5、10、20、50ng/mL)考察儀器靈敏度、重現(xiàn)性和線性范圍。

靈敏度：結果表明氨基甲酸乙酯LOD（S/N≥3）為0.1ng/mL

線性范圍：氨基甲酸乙酯在0.5ng/mL~50ng/mL濃度范圍內呈良好的線性關系。

重現(xiàn)性：結果表明，在0.5ng/mL痕量濃度時氨基甲酸乙酯的的RSD值為2.11%，具有非常好的重現(xiàn)性。

樣品分析

檢測5例客戶樣本，按照本文所建立方法進行分析。由下圖可以看出，氨基甲酸乙酯得到了比較好的分析結果，各離子通道在掃描時間內不存在干擾峰，可準確定量定性。

樣品實際分析結果

結論

本方法建立了LC-MS/MS測定氨基甲酸乙酯的分析方法。該方法分析速度快，靈敏度高，穩(wěn)定性好，可以滿足痕量氨基甲酸乙酯的分析要求，適合大批量定性和定量分析。

三重四極桿液相色譜-質譜聯(lián)用儀TSQ Altis 現(xiàn)場實拍圖

參考文獻：

[1]朱懷遠, 莊亞東, 劉獻軍, 朱瑩, 張媛, 尤曉娟, 張映, 熊曉敏. (2013). 液相色譜-串聯(lián)質譜法測定卷煙主流煙氣中的氨基甲酸乙酯. 分析測試學報, 32(8), 963 - 967. doi:10.3969/j.issn.1004 - 4957(2013)08-0963-05

[2]Alberts, P., Stander, M. A., & De Villiers, A. (2011). Development of a novel solid-phase extraction, LC - MS/MS method for the analysis of ethyl carbamate in alcoholic beverages: application to South African wine and spirits. Food Additives & Contaminants, 28(7), 826-839.doi:10.1080/19440049.2011.568010

[3]Lee, G., Bang, D., Lim, J., Yoon, S., Yea, M., & Chi, Y. (2017). Simultaneous determination of ethyl carbamate and urea in Korean rice wine by ultra-performance liquid chromatography coupled with mass spectrometric detection

. Journal of Chromatography B.doi:10.1016/j.jchromb.2017.09.011